[식품공전] 비브리오 미생물 시험법 (feat. 장염, 패혈증, 콜레라)

안녕하세요 호선생입니다.

 

식품공전 미생물시험법
비브리오(Vibrio) 정성 시험법을 정리해볼까 합니다.

 

보시는 시기에 따라 새로운 시험법이 추가됐을 수 있으니,
참고용으로 봐주시면 감사하겠습니다 :)

 

장염비브리오 (Vibrio parahaemolyticus)

 

*증균배양
검체 25 g 또는 25 mL를 225 mL Alkaline 펩톤수 (APW)를 가한 후, 증균배양
(35～37℃, 18～24 h)

 

검체를 넣지않은 동일 APW를 대조시험액(블랭크)으 시험조작의 무균여부를 확인

 

 

*분리배양
증균배양액을 TCBS에 접종하여 배양
(35～37℃, 18～24 h)

 

*성상
청록색의 서당(sucrose) 비분해 집락

장염 비브리오(Vibrio parahaemolyticus) TCBS 성상

 

*확인시험
step 1.
성상의 집락을 LIM 반유동배지, 2% NaCl+NA 각각 접종 후 배양
(35～37℃, 18～24 h)

 

*성상
2% NaCl+NA: 집락발육

LIM:
Lysine Decarboxylase 양성
Indole 생성
운동성 양성

Oxidase test: 양성(파란색)

 

step 2.
0, 6, 10% NaCl+APW test,
1% Arginine 분해시험,
ONPG시험 실시

 

*성상
0, 6, 10% NaCl+APW: 음성, 양성, 음성

Arginine 분해: 음성

ONPG test: 음성

 

 

비브리오 패혈증균 (Vibrio vulnificus)

 

*증균배양
검체 25 g 또는 25 mL를 225 mL APW를 가한 후, 증균배양
(35～37℃, 18～24 h)

검체를 넣지않은 동일 APW를 대조시험액(블랭크)으로 시험조작의 무균여부를 확인

 

*분리배양
증균배양액을 TCBS와 mCPC 각각 접종하여 배양
(35～37℃, 18～24 h)

 

*성상
TCBS: 청록색 집락
mCPC: 노란색 집락

 

*확인시험
step 1.
성상의 집락을 LIM 반유동배지, 2% NaCl+NA 각각 접종 후 배양
(35～37℃, 18～24 h)

*성상
2% NaCl+NA: 집락발육

LIM:
Lysine Decarboxylase 양성
Indole 생성
운동성 양성

Oxidase test: 양성(파란색)

 

step 2.
0, 6, 10% NaCl+APW test,
1% Arginine 분해시험,
ONPG시험 실시

 

*성상
0, 6, 10% NaCl+APW: 음성, 양성, 음성

Arginine 분해: 음성

ONPG test: 양성

 

 

비브리오 콜레라 (Vibrio cholerae)

 

*증균배양
검체 25 g 또는 25 mL를 225 mL APW를 가한 후, 증균배양
(35～37℃, 신선수산물: 6 ~ 8 h 냉동수산물: 18～24 h)

검체를 넣지않은 동일 APW를 대조시험액(블랭크)으로 시험조작의 무균여부를 확인

 

*분리배양
증균배양액을 TCBS와 mCPC 각각 접종하여 배양
(35～37℃, 18～24 h)

 

*성상
TCBS: 노란색 집락
mCPC: 녹색-자주색 집락

 

*확인시험
step 1.
성상의 집락을 LIM 반유동배지, 2% NaCl+NA 각각 접종 후 배양
(35～37℃, 18～24 h)


*성상
2% NaCl+NA: 집락발육

LIM:
Lysine Decarboxylase 양성
Indole 생성
운동성 양성

Oxidase test: 양성(파란색)

 

 

step 2.
0, 6, 10% NaCl+APW test
1% Arginine 분해시험,
ONPG시험 실시

 

*성상
0, 6, 10% NaCl+APW: 양성, 음성, 음성

Arginine 분해: 음성

ONPG test: 양성

 

*필요에 따라, 비브리오 콜레라 진단용 항혈청을 사용한 응집반응, PCR 등
 결과에 따라 O1, O139 혈청형을 확인한다.

 

같은 배지와 실험이지만, 성상이 조금씩 달라서 꼭 외워두어야할 사험법과
결과 성상인 것 같습니다.

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